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動物抑郁行為實(shí)驗手冊丨大小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗測試方法與指標(biāo)評價

實(shí)驗儀器

強(qiáng)迫游泳測試使用一個高 25至 50厘米、直徑10至 30厘米的圓柱形水箱來容納嚙齒動物和小型靈長類動物。水箱中充滿室溫水,以防止對象將其爪子或尾巴接觸到圓柱體的地板并防止逃跑。不透明的分隔器通常在水箱內(nèi)使用,以允許多個受試者進(jìn)行測試。

雖然可以進(jìn)行實(shí)時評分,但建議使用視頻和跟蹤軟件,例如VisuTrack動物行為分析軟件(上海欣軟),以避免評分不準(zhǔn)確和差異。坦克必須有足夠的照明以提高記錄質(zhì)量,并且可以使用白噪聲發(fā)生器來掩蓋可能影響主體表現(xiàn)的任何噪聲。


實(shí)驗方法

(1)實(shí)驗前調(diào)節(jié)測試箱內(nèi)水溫,水溫應(yīng)為 23 ~25℃ 。水深應(yīng)根據(jù)動物體重進(jìn)行調(diào)整,動物尾巴與測試箱底面保持一定距離。

(2)如同時進(jìn)行多只動物實(shí)驗,每兩只動物間應(yīng)用不透明擋板隔開。

(3) 大鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗,應(yīng)在實(shí)驗前1d預(yù)游,24h后進(jìn)行強(qiáng)迫游泳實(shí)驗。記錄 5min內(nèi)動物的不動時間、游泳時間及攀爬時間。

(4)小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗,應(yīng)在檢測當(dāng)天進(jìn)行,小鼠游泳時間應(yīng)為6min,記錄后 4min的游泳時間、不動時間及攀爬時間。


評價指標(biāo)

評價指標(biāo)應(yīng)采用動物不動、攀爬、游泳三類動作的時間及次數(shù)進(jìn)行判定。

(1)不動( immobility):動物在水中停止掙扎,呈漂浮狀態(tài),僅有輕微的肢體運(yùn)動以保持頭部浮在水面。不動時間越長表明抑郁程度越重。正常小鼠不動時間在檢測時間的 40% ~ 80%內(nèi);正常大鼠不動時間在檢測時間的 30% ~ 70%內(nèi);抑郁行為判斷標(biāo)準(zhǔn):不動時間與對照組相比顯著性增加(P<0. 05)。

(2)游泳(swimming):動物進(jìn)行流暢、協(xié)調(diào)的運(yùn)動,動物四肢始終在水面以下。游泳時間和游泳距離越少,表明抑郁程度越重。

(3)攀爬( climbing):動物四肢強(qiáng)有力伸出水面,并沿測試箱壁做劇烈的上下動作。5min檢測期內(nèi),SD 大鼠攀爬時間 60 ~ 130s。攀爬時間越少,表明動物抑郁程度越重。

注意事項

  • 不同種系實(shí)驗動物在 FST中表現(xiàn)不一樣。瑞士小鼠對 作用于 5 -HT/NE神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)的抗抑郁藥品zui敏感, 而抗抑郁藥品對 DBA/2 小鼠無行為學(xué)效應(yīng), C57BL/6JRj品系小 鼠是唯1對安非他酮敏感的小鼠 。說明要做到研究結(jié)果的可比性, 必須選擇相同種系的實(shí)驗動物。

  • 盡管實(shí)驗用鼠品種相似, 使用客觀評價標(biāo)準(zhǔn), 實(shí)驗動物 在 FST中表現(xiàn)仍有差異。

  • 實(shí)驗室內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)與條件, 包括飼養(yǎng)條件、光照時間對研究結(jié)果都有影響。

  • 在 FST中, 實(shí)驗動物行為會受到水溫影響, 在冷水中容易出現(xiàn)靜止不動行為;相反, 在溫度較高水中不動行為出現(xiàn)較晚。所以通常將水溫設(shè)定在 23 ~ 25℃。

  • 水桶內(nèi)水的高度應(yīng)當(dāng)盡量保證實(shí)驗動物的后肢不能支撐或者接觸到水桶底部

  • 計算動物絕望狀態(tài)的行為,通常以動物的后肢是否活動為判斷依據(jù)

  • 實(shí)驗時間不能太長,通常建議大鼠6min,小鼠5min左右

要點(diǎn)概括

  • 強(qiáng)迫游泳測試是由 Roger D. Porsolt 在 1970 年代后期開發(fā)的,作為一項簡單的任務(wù),用于評估和評估小動物中藥品和化合物的抗抑郁特性。

  • 該任務(wù)也被稱為行為絕望或習(xí)得性無助任務(wù),因為受試者成為表示絕望的固定體。

  • 該任務(wù)使用一個裝滿水的圓柱形水箱,這樣當(dāng)對象被放入其中時,它無法到達(dá)地板或逃離水箱。

  • 不動包括平衡身體和保持頭部高于水面所需的任何行為。

  • 時間采樣技術(shù)將行為分為兩種類型:攀爬和游泳。這種技術(shù)提供了一種方便的方法來量化逃逸行為。

  • 當(dāng)用抗抑郁藥和其他化合物治liao時,不動行為會降低。

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