高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)方法
（elevated plus-maze test, EPM）
一.實(shí)驗(yàn)原理
嚙齒類動物具有探究新環(huán)境的習(xí)性，但是又厭惡強(qiáng)光和開闊地。EPM就是利用嚙齒類動物對新異環(huán)境的探究行為和對高懸著的開臂的恐懼形成的矛盾沖突狀態(tài)，評價**的抗焦慮或致焦慮作用。EPM*初是由Montgomery在1955年的工作發(fā)展而來的。Pellow等人根據(jù)研究需要設(shè)計出了具有兩個開臂和兩個閉臂的十字迷宮，并將迷宮抬高借以增加動物進(jìn)入開臂時的恐懼。高架十字迷宮是一個簡單、快速、結(jié)果重復(fù)性好的焦慮檢測模型，因此廣泛應(yīng)用于抗焦慮**的研究與開發(fā)。
二.實(shí)驗(yàn)裝置
高架十字迷宮可以是木質(zhì)結(jié)構(gòu)，現(xiàn)在多為無味的塑料材質(zhì)，顏色為黑色。上海欣軟信息科技有限公司大鼠高架十字迷宮包括50cm*10cm的兩個相對開臂（open arm）和兩個50cm*10*40cm的相對閉臂（closed arm），閉臂的上部是敞開的。迷宮中央有一10cm*10cm的開闊部，迷宮距離地面50cm高。迷宮上方安裝錄像監(jiān)控器，以錄制動物在迷宮中的活動情況，以供日后分析使用。
三.實(shí)驗(yàn)方法
1. 在實(shí)驗(yàn)前一個星期，每天撫摸實(shí)驗(yàn)動物1-5min，連續(xù)7天，借以消除實(shí)驗(yàn)動物對實(shí)驗(yàn)者的恐懼。
2. 將實(shí)驗(yàn)動物放入迷宮中央?yún)^(qū)，頭朝開臂，并注意此后每只實(shí)驗(yàn)動物均放在同一位置。同時開啟攝像監(jiān)控器記錄5min內(nèi)實(shí)驗(yàn)動物開臂和閉臂的進(jìn)入次數(shù)及進(jìn)入各臂的時間。實(shí)驗(yàn)過程中實(shí)驗(yàn)者需距離迷宮1米的距離。
3. 記錄結(jié)束后將實(shí)驗(yàn)動物放回飼養(yǎng)籠具內(nèi)。同時清理迷宮，并用5%的醋酸水溶液或75%的酒精擦拭迷宮，借以消除動物氣味對后繼實(shí)驗(yàn)動物的影響。
四.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
主要應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：
1.開臂進(jìn)入次數(shù)百分比＝ 開臂進(jìn)入次數(shù)/開臂進(jìn)入次數(shù)＋閉臂進(jìn)入次數(shù)
2.開臂滯留時間百分比＝ 開臂滯留時間/開臂滯留時間＋閉臂滯留時間
此兩指標(biāo)作為評價焦慮的指標(biāo)，通常這兩個指標(biāo)高度相關(guān)。如果一個**增加動物對開臂的偏愛（即增加進(jìn)入開臂的次數(shù)和在開臂內(nèi)滯留時間），卻不改變?nèi)氡劭偞螖?shù)和入臂總時間，也即開臂進(jìn)入次數(shù)百分比和開臂滯留時間百分比升高，則認(rèn)為該**具有抗焦慮的作用。相反一個**如果減少實(shí)驗(yàn)動物對開臂的偏愛，而入臂總次數(shù)和入臂總時間不變，則認(rèn)為該**具有致焦慮的作用。
五.注意事項(xiàng)
1. 為了提高大鼠入臂總次數(shù)，避免大鼠總是躲在閉臂中，通常在測試前先將大鼠放在開闊場地（open field）中適應(yīng)5min后再放入迷宮。
2. 實(shí)驗(yàn)前一周每天撫摸大鼠可以明顯減少大鼠對實(shí)驗(yàn)者的恐懼感以及無關(guān)刺激對迷宮中大鼠的影響。
3. 盡管還沒有證據(jù)證實(shí)在**中不同時間對于實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否有明顯的影響。但是結(jié)合本人實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)建議實(shí)驗(yàn)動物檢測時間*好在上午9:00至下午15:00之間進(jìn)行，如果有條件，且需要重復(fù)多次檢測，盡量在每天同一時間段檢測，以減少數(shù)據(jù)的波動。
4. 如果實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)動物從高架上跌落，*好將此動物剔除?，F(xiàn)在的廠家生產(chǎn)的高架十字迷宮在開臂的周邊加了一個小邊。但這樣會改變焦慮的性質(zhì)和降低抗焦慮**的敏感性。
5. 高架十字迷宮具有某些表觀信度，動物不愿探究迷宮開臂可能由于嚙齒類動物厭惡空曠區(qū)域和迷宮抬高引起的恐懼兩者共同作用的結(jié)果，目前尚不清楚這兩個因素哪個在致焦慮中占優(yōu)勢。
6. 進(jìn)入開臂的次數(shù)和在開臂停留的時間隨年齡的增長而減少。因此年齡較大的大鼠抗焦慮的效果較弱，但是對于安定類**的**反應(yīng)增強(qiáng)。
7. 高架十字迷宮*初用于雄性大鼠，但是也可用于雌性大鼠。但是所測定的行為有所不同。用雄性大鼠主要測定焦慮，而用雌性大鼠主要測定活動性。
8. 除了大鼠，高架十字迷宮還用于小鼠，也有文獻(xiàn)報道用沙土鼠進(jìn)行檢測，但是存在明顯品系差異。
9. 迷宮設(shè)計時對開臂的相對強(qiáng)光有所考慮。實(shí)驗(yàn)中建議高架十字迷宮光源避免直接照射在高架十字迷宮上，也需要避免光線不均勻的照射在各臂上?？稍诟呒苁置詫m周圍懸掛具有一定遮光性的布簾造成迷宮的周邊環(huán)境相對一致以及弱光照環(huán)境。
